常规HE染色是一种常用于组织学研究和病理学诊断的染色方法，HE代表Hematoxylin（苏木精）和Eosin（伊红），分别是两种染色剂的名称。这种染色方法可用于染色组织切片，以使不同的细胞和组织结构在显微镜下可视化，从而提供有关组织结构和病理学状态的信息。

以下是常规HE染色的主要步骤：

1. 组织样本处理：组织样本通常需要被取出、固定并包埋在石蜡中，以保持其结构。这些样本将被切成薄片（通常为3至5微米厚）并放置在载玻片上。
2. 苏木精染色：组织切片首先被浸泡在苏木精溶液中，这会使细胞核和某些细胞器变为蓝色。
3. 洗涤：组织切片会在蒸馏水或洗涤液中洗涤，以去除多余的苏木精。
4. 伊红染色：组织切片接下来会被浸泡在伊红溶液中，这会使胞浆和细胞器染成粉红色。
5. 洗涤：组织切片再次在水中洗涤，以去除多余的染色剂。
6. 脱水和封片：组织切片经过一系列酒精浓度逐渐升高的脱水步骤，然后用透明质地封片剂封装。最终，载玻片上的组织切片将用玻璃盖片覆盖。
7. 显微镜观察：使用显微镜观察常规HE染色后的组织切片。细胞核呈蓝色，胞浆和细胞器呈粉红色，使不同细胞和组织结构可以清晰可见。

1. 组织样本类型：确定您要染色的组织样本类型。常规HE染色通常用于固定的组织样本，如手术切除标本、活检或尸检样本。这可以包括器官组织、肿瘤组织、肾脏组织等。
2. 适当的固定：样本需要进行适当的固定，以保持其结构和抗原的完整性。福尔马林（formalin）是一种常用的固定剂，但取决于样本类型和研究目的，可能需要选择其他固定剂。
3. 切片制备：样本需要被切成薄片（通常为3至5微米厚），这些切片将被放置在载玻片上以进行染色。确保切片的均匀性和适当的厚度。
4. 抗原修复：对于一些组织样本，可能需要进行抗原修复步骤，以揭示抗原的结构。选择合适的修复方法和条件非常重要。
5. 切片大小：根据您的研究目的和使用的载玻片尺寸，选择适当大小的切片。通常使用的载玻片尺寸为25x75毫米。
6. 质量控制：在染色实验之前，进行质量控制步骤，如检查固定是否充分、切片的均匀性和抗原修复的有效性。质量控制有助于确保实验的可靠性和可重复性。
7. 标本标识：每个样本需要明确标识，包括患者信息（通常用匿名编码代替）、样本类型、日期等。这有助于避免样本混淆和追踪。
8. 实验记录：记录取样过程的细节，包括固定时间、切片制备方法、抗原修复条件等。详细的实验记录对于结果的解释和验证非常重要。
9. 存储：根据染色方法和时间表，妥善存储样本。不同的染色方法和样本类型可能需要不同的存储条件。

1. 染色不均匀：问题：染色在样本上不均匀，导致一些区域过于染色，而其他区域则染色不足。解决方法：确保染色剂均匀涂覆在样本上，避免染色剂干燥。还可以尝试优化染色时间和温度。
2. 背景染色：问题：染色后的背景显示不希望的染色。解决方法：使用适当的阻断剂，如牛血清、蛋白质或非特异性抗体，以减少背景染色。优化洗涤步骤也可以帮助去除多余的染色剂。
3. 染色颜色不符合预期：问题：染色的颜色与预期不符，可能是过深或过浅。解决方法：检查染色步骤和条件，包括染色剂的浓度和时间。根据需要调整这些参数。
4. 抗原修复问题：问题：抗原修复步骤可能不足或过度，导致抗原结构无法揭示或破坏。解决方法：优化抗原修复条件，包括修复液的类型、温度和时间。进行实验前，最好进行一些预测试验。
5. 切片问题：问题：切片可能太薄或太厚，影响染色结果。解决方法：确保切片的均匀性和适当的厚度，通常为3至5微米。
6. 质量控制：问题：不充分的质量控制可能导致结果的不可验证性。解决方法：详细记录每个实验步骤，包括固定、切片制备、染色条件等。这有助于排除问题并重新验证结果。
7. 实验记录：问题：实验记录不完整或不准确可能导致问题的难以解决。解决方法：确保详细记录取样过程的细节，包括固定时间、切片制备方法、抗原修复条件等。
8. 染色剂质量问题：问题：染色剂可能不稳定或质量不佳。解决方法：准备新鲜的染色剂，按照方法手册中的指导进行制备和存储。